O presente projeto visa a desenvolver e padronizar métodos avançados de caracterização físico-química e avaliação toxicológica de nanossistemas, utilizando a anfotericina B (AmB) como modelo farmacêutico. A inovação está na abordagem integrada, que correlaciona as características físico-químicas das nanoformulações com sua toxicidade e eficácia, buscando soluções para os desafios de biodisponibilidade e efeitos adversos da AmB. Serão desenvolvidas três nanoformulações distintas: nanocristais, nanopartículas poliméricas e microemulsão-gel, explorando técnicas de produção como moagem por pérola e microfluídica, para uso oral, tópico e pulmonar O projeto se destaca por empregar modelos alternativos de toxicidade, com avaliações in vitro e in vivo em embriões e larvas de Zebrafish (Danio rerio), um organismo que compartilha alta homologia genética com os humanos e possibilita uma análise dinâmica dos efeitos das nanoformulações. A proposta inova ao comparar diferentes sistemas nanoestruturados carregando o mesmo ativo, permitindo uma avaliação direta do impacto das propriedades físico-químicas na toxicidade. Além disso, o projeto contribuirá para a padronização de testes toxicológicos específicos para nanopartículas, atendendo a uma lacuna na regulamentação vigente. Com essa pesquisa, espera-se não apenas promover avanços na nanotecnologia farmacêutica, como também proporcionar subsídios para a regulamentação de nanossistemas, fortalecendo parcerias nacionais e internacionais e capacitando novos pesquisadores na área.