Orientador(es): PATRICIA DE ALBUQUERQUE GARCIA REDONDO
Área temática: BIOLOGIA MOLECULAR E CELULAR
Modalidade de apresentação: SESSÃO DE PÔSTER
Bolsa: Discente com bolsa externa à UNIRIO
O câncer colorretal é a terceira neoplasia mais incidente e a segunda com as maiores taxas de mortalidade no Brasil e no mundo. Nesse contexto, a pesquisa pré-clínica de drogas antitumorais tem a pior taxa de sucesso dentre todas as áreas terapêuticas, vez que, somente 5% dos compostos atingem a fase III de testes clínicos. Uma das hipóteses desse insucesso é a existência das células-tronco tumorais no microambiente tumoral, por possuírem a capacidade de autorrenovação e conferir resistência terapêutica. Estratégias que visam a reprogramação metabólica, uma marca do câncer relevante no estudo oncológico, têm crescido nos últimos anos. Dessa forma, considerando o potencial terapêutico do β-hidroxibutirato (BHB), principal corpo cetônico produzido fisiologicamente pelo organismo e descrito com ação em uma variedade de mecanismos de sinalização, este trabalho teve como objetivo avaliar seus efeitos na viabilidade celular da linhagem de adenocarcinoma colorretal, HT-29, e em propriedades funcionais associadas às células-tronco tumorais. O tratamento com BHB foi realizado por 72 horas, utilizando diferentes doses (5mM, 10mM e 20mM). A análise da viabilidade celular foi realizada através dos ensaios tripan, LIVE/DEAD, MTT e CellTiter Glo; a quantificação de ácidos nucleicos pelo método CyQuant e a análise das propriedades tronco via ensaio de ELDA e SFA. Os resultados demonstraram que, na dose de 5Mm, não ocorre uma redução significativa dos parâmetros analisados. O ensaio de exclusão por tripan mostrou uma redução significativa na viabilidade celular nas concentrações de 10mM e 20mM, sugerindo efeito citotóxico dependente da dose, em contrapartida, o ensaio LIVE/DEAD, revelou que o achado de células mortas foi raro, levantando o questionamento sobre a real extensão da citotoxicidade do BHB. Os ensaios adicionais demonstraram uma característica própria do metabólito estudado. Na dose de 10mM, houve uma redução significativa de ATP (17,5%), sem alterar a atividade mitocondrial ou o conteúdo de DNA de forma significativa, porém, já sendo suficiente para interferir na habilidade de formação de esferas tumorais (67,2%), propriedade relacionada ao potencial tronco. A dose de 20mM, por sua vez, provoca redução na quantidade de células (77,1%), além de apresentar tamanho de efeito maior na viabilidade metabólica medida por MTT (64,2%) e CTG (57,8%), sendo ainda mais inibitória na formação de esferas tumorais (47,5%). Este cenário permite postular que a habilidade de formação de esferas pode ter uma dependência metabólica de ATP, ou ainda, que o BHB modula algum mecanismo celular comum tanto à quantidade de ATP total na célula, quanto à sua habilidade de formar esferas. Conclui-se, dessa forma, que o BHB exerce efeitos biológicos importantes na bioenergética celular e na capacidade de formação de esferas, sugerindo um possível efeito terapêutico para esse composto, evidenciando a necessidade de estudos adicionais para elucidar seus mecanismos de ação.
DU, L. et al. Targeting stemness of cancer stem cells to fight colorectal cancers. Seminars in Cancer Biology, fev. 2021. ZAKRZEWSKI, W. et al. Stem cells: past, present, and future. Stem Cell Research & Therapy, v. 10, n. 1, 26 fev. 2019. DMITRIEVA-POSOCCO, O. et al. β-Hydroxybutyrate suppresses colorectal cancer. Nature, v. 605, n. 7908, p. 160–165, 5 maio 2022.