Orientador(es): EDUARDO KENNEDY CARRÃO DANTAS (CO-ORIENTADOR), CARLOS FERNANDO ARAUJO LIMA (ORIENTADOR)
Área temática: BIOLOGIA MOLECULAR E CELULAR
Modalidade de apresentação: SESSÃO DE PÔSTER
Bolsa: IC/UNIRIO
Os suplementos alimentares tornaram-se uma parte integrante da vida contemporânea, utilizados para aumentar energia, concentração e resistência. No entanto, o consumo excessivo gera preocupação devido aos possíveis efeitos adversos. Diante disso, avaliar a toxicogenética desses produtos é crucial para determinar seus efeitos potencialmente prejudiciais e estabelecer dosagens seguras. Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial citotóxico e mutagênico de um suplemento alimentar brasileiro à base de cafeína, adquirido no Estado do Rio de Janeiro e mantido anônimo para evitar conflitos de interesse. A amostra foi dissolvida em uma solução de DMSO 1%. A metodologia empregou dois tipos de linhagens celulares: HepG2 (carcinoma hepatocelular humano) e HEK293 (rim embrionário humano). Essas linhagens foram escolhidas por seus papéis centrais no metabolismo e excreção de compostos exógenos. Para avaliar a citotoxicidade, foi realizado o ensaio de viabilidade celular WST-1. As células foram expostas a concentrações do suplemento variando de 0 a 500 μg/mL por 24, 48 e 72 horas. A viabilidade celular foi calculada em relação ao controle negativo (DMSO 1%), estabelecido como 100%, para determinar a concentração letal 50 (LC50). Para avaliar a genotoxicidade, foi realizado o Ensaio de Micronúcleo (CBMN). As células foram tratadas com concentrações entre 31 e 500 μg/mL do suplemento por 24 horas. A citocalasina B foi adicionada para bloquear a citocinese, e as lâminas foram coradas com Giemsa para análise em microscopia óptica. Foram avaliados a frequência de micronúcleos (MNs), brotamentos nucleares (NBUDs) e pontes nucleoplasmáticas (NPBs). O Índice de Divisão Nuclear (NDI) também foi calculado. Ciclofosfamida e Mitomicina C foram usadas como controles positivos para as linhagens HepG2 e HEK293, respectivamente. O ensaio de WST-1 revelou que o suplemento induz citotoxicidade dose e tempo-dependente em ambas as linhagens celulares (HepG2 e HEK293) ao longo dos períodos de incubação (24h, 48h e 72h). No ensaio de CBMN, observou-se uma resposta genotóxica também dose-dependente. Em ambas as linhagens houve um aumento significativo na formação de MNs, NBUDs e NPBs. Paralelamente, foi relatada uma diminuição no NDI. Estes biomarcadores evidenciam que os princípios ativos do suplemento ou seus metabólitos podem causar danos ao DNA e instabilidade cromossômica, eventos intimamente associados ao potencial carcinogênico e a outros efeitos adversos à saúde. Em conclusão, os resultados demonstram que o suplemento alimentar à base de cafeína testado apresenta significativo potencial citotóxico e genotóxico in vitro. Esses achados alertam para os riscos associados ao seu consumo e destacam a urgente necessidade de mais investigações para orientar regulamentações e garantir a segurança dos usuários.
Carrão-Dantas, E. K., Araújo-Lima, C. F., Ferreira, C., Goldstein, A., Aiub, C., Coelho, M., Felzenszwalb, I., 2022. “Toxicogenetic assessment of a pre-workout supplement: In vitro mutagenicity, cytotoxicity, genotoxicity and glutathione determination in liver cell lines and in silico ADMET approaches.” Mutation Research – Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis 879-880:503517. DOI: 10.1016/j.mrgentox.2022.503517 Carrão-Dantas, E.K., Ferreira, C.L.S., Goldstein, A.C., Fernandes, A.S., Ferraz, E.R.A., Felzenszwalb, I., Araújo-Lima, C.F., 2024 Marketable 1,3-dimethylamylamine and caffeine-based thermogenic supplements: Regulatory genotoxicity assessment through in vitro and in silico approaches, Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 87:6, 245-265. DOI: 10.1080/15287394.2023.2294925 OECD. Test No. 487: In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test. Test No. 487: In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test, n. July, 2016.